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微透析在腦科學(xué)中的應(yīng)用
腦部微透析是利用微透析技術(shù)對(duì)特定腦部區(qū)域進(jìn)行連續(xù)灌注采樣，用于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)動(dòng)物大腦內(nèi)源性和外源性物質(zhì)細(xì)胞外含量的變化的新技術(shù)。該技術(shù)常與電化學(xué)檢測(cè)、熒光、測(cè)定等系統(tǒng)聯(lián)合，對(duì)離子、單胺類(lèi)、氨基酸*遞質(zhì)、能量物質(zhì)等物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)的濃度變化監(jiān)測(cè)。由于具有連續(xù)取樣、動(dòng)態(tài)觀(guān)察、定量分析、采樣量小等特點(diǎn)，在*科學(xué)的領(lǐng)域中已獲得越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。微透析系統(tǒng)結(jié)合電生理、光遺傳、行為學(xué)等研究手段同時(shí)檢測(cè)，同步地不同數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄分析。
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微透析系統(tǒng)
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目前測(cè)定回收率的方法主要有以下幾種：1，外標(biāo)法計(jì)算被測(cè)物質(zhì)相對(duì)濃度的變化時(shí)， 可簡(jiǎn)單地采用體外回收率法。測(cè)定宜在取樣后立即進(jìn)行， 將探針?lè)湃胍阎獫舛鹊臉?biāo)準(zhǔn)溶液中， 用與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)相同的流速灌流探針。達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)后收集灌流液并進(jìn)行檢測(cè)。測(cè)定濃度與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度之比就是體外回收率。此法雖簡(jiǎn)單易行， 但由于被測(cè)物質(zhì)在體外時(shí)與體內(nèi)的環(huán)境狀況不同， 檢測(cè)結(jié)果不能?chē)?yán)格地等同于實(shí)際的回收率。2，內(nèi)標(biāo)法往灌流液中加入已知濃度且性質(zhì)與被分析物質(zhì)相似的另一種物質(zhì)做內(nèi)標(biāo)，瑞典微透析系統(tǒng)經(jīng)銷(xiāo)商，內(nèi)標(biāo)物不僅在擴(kuò)散性質(zhì)上與被分析物一致，而且還要在體內(nèi)的代謝過(guò)程中也盡可能一致，測(cè)出透析率即作為被分析物的回收率。由于選擇內(nèi)標(biāo)的局限性很大， 限制了此法的應(yīng)用。3，反透析法假設(shè)被測(cè)物從兩個(gè)方向通過(guò)半透膜是同等的。在灌流液中加入一定濃度的內(nèi)標(biāo)物(cic) ，動(dòng)物微透析系統(tǒng)經(jīng)銷(xiāo)商，在與體內(nèi)透析相同的條件下操作， 測(cè)定透析液中內(nèi)標(biāo)物的濃度(cec) ，體內(nèi)回收率(rin ，vivo ) 可用下式計(jì)算：rin vivo = (1 cec/ cic) ×100 %本法要求內(nèi)標(biāo)物具有生物惰性， 盡可能與被測(cè)物相似。
微透析系統(tǒng)
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微透析探針是微透析實(shí)驗(yàn)中重要的組成部分。所有cma的探針除了線(xiàn)性探針之外，cma微透析系統(tǒng)經(jīng)銷(xiāo)商，都是采用同心圓的結(jié)構(gòu)來(lái)制作的。探針兩個(gè)端口，入口端和出口端。一個(gè)內(nèi)部的導(dǎo)管能使灌流液從探針的入口端直接流到探針的頂端，隨之灌流液則會(huì)充滿(mǎn)半透膜和導(dǎo)管之間的區(qū)域，之后灌流液繼續(xù)沿著外管從出口流出。探針的所有金屬部分都經(jīng)過(guò)預(yù)處理以防止灌流液中的易變成分發(fā)生氧化。
清醒的動(dòng)物在做cns的微透析實(shí)驗(yàn)時(shí)，在植入探針之前需要在動(dòng)物醉狀態(tài)下先植入-個(gè)套管，等大鼠清醒要插入探針時(shí)，可以把套管中的假探針拔出，再插入*的探針開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，這樣就不用在動(dòng)物手術(shù)時(shí)就植入探針，保證探針的使用效率。
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